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sds page浓缩胶和分离胶
有人有western blot的Tris-乙酸胶的配方吗?还有相关电泳液的配方?急...
答:
三、配制Tris-甘氨酸
SDS
聚丙烯酰胺凝胶电泳
分离胶
所用溶液 表1.配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液成分 配制不同体积和浓度凝胶所需各成分的体积/mL 5 10 15 20 25 30 40 50 10 %胶 水 1.9 4.0 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8 30 %丙烯酰胺混合液 1.7 3.3 5.0...
凝胶的原理方法
答:
酸性蛋白通常在非 变性凝胶电泳中采用的pH是8.8的缓冲系统,蛋白会带负电荷,蛋白会相阳极移动;而碱性蛋白通常电泳是在微酸性环境下进行,蛋白带正电荷,这时候需要将阴极和阳极倒置才可以电泳分离酸性蛋白。 1.40%胶贮液(Acr:Bis=29:1);2.4×
分离胶
Buf(1.5 MTris-HCl,pH 8.8):18.2 ...
SDS-PAGE
跑电泳时,跑到上层
胶和
下层胶的分界处要不要变换电压?
答:
你好,
SDS-PAGE
跑电泳时,跑到
浓缩胶和分离胶
分界处时一般是要换电压的。具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严。我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可 希望有所帮助,不懂可以追问,有帮助请采纳 ...
蛋白大小为60kd,用多少浓度的
分离胶
答:
胶
浓度同蛋白其迁移速率所采用裁膜式于蛋白迁移位置要事先预判10%胶浓度高迁移慢些都相同位置裁看条带6,8%胶膜需要裁更靠缘或者前裁掉膜半部再拿做做实验试试 电泳各种素影响其配置完全胶浓度变化述原需要考虑
SDS-PAGE
原理
答:
SDS-PAGE
一般采用的是不连续缓冲系统,与连续缓冲系统相比,能够有较高的分辨率。之所以会有分离胶和浓缩胶之分,
浓缩胶和分离胶
的PH值不同,前者主要表现为浓缩效用,后者表现为分子筛效用。浓缩胶的pH是6.8,在这个pH条件下,缓冲液中的HCl的Cl离子几乎全部解离,Gly的等电点为6.0,仅少数解离为负...
在生物学里面
SDS-PAGE
表示什么啊
答:
这样的蛋白质—
SDS
复合物,在凝胶中的迁移率,不 再受蛋白质原的电荷和形状的影响,而取决于分子量的大小由于蛋白质-SDS复合物在单位长度上带有相等的电荷,所以它们以相等的迁移速度从
浓缩胶
进入
分离胶
,进入分离胶后,由于聚丙烯酰胺的分子筛作用,小分子的蛋白质可以容易的通过凝胶孔径,阻力小,迁移...
sds-page
电泳
分离
蛋白质的原理,这种方法为什么可以测定蛋白质分子量...
答:
电泳时的正极与负极都会发生电解反应,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。在外电场的作用下,带点颗粒将向着与其电性相反的电极移动,这种现象称为电泳。电泳技术可用于氨基酸、肽、蛋白质和核苷酸等生物分子的分析
分离
和制备。 区带电泳是由于在支持物上电泳蛋白质混合物被分离为若干区带。
为什么甘氨酸在聚酰胺中跑得快一些
答:
Q:配胶缓冲液系统对电泳的影响? A:在
SDS-PAGE
不连续电 泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,
浓缩胶
是pH6.7,
分离胶
pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中, 其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子...
SDS
-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中。当
分离胶
加完之后为什...
答:
并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使
浓缩胶和分离胶
都处于同一水平面上。甘氨酸是为了解离出甘氨酸根离子,甘氨酸根离子可以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩在一起。样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的,因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合,以便于
SDS-PAGE
的进行。但是有...
如何调节
sds- page
中的ph和tris?
答:
在
SDS-PAGE
中,
分离胶和浓缩胶
中tris-Hcl的pH值不同,主要是因为它们的作用和配方不同。分离胶的主要作用是分离蛋白质,它的配方中含有更高浓度的Tris-Hcl,pH范围在8.9左右。这种高pH环境有助于使蛋白质更好地分离,因为蛋白质的带电性会随着pH值的升高而改变,使它们更容易在电场中移动。同时,...
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